Lokalizacja regionów wiążących mysiego monoklonalnego przeciwciała anty-czynnik VIII i ludzkiego alloprzeciwciała czynnika VIII, które hamują aktywność prokoagulacyjną czynnika VIII, do reszt aminokwasowych treoniny351-seryny 365 czynnika VIII

Zlokalizowaliśmy region wiążący wcześniej opisanego przeciwciała monoklonalnego anty-czynnik VIII (FVIII) hamującego (C5) do reszt aminokwasowych Thr351-Ser365 z 54-kD wytworzonego trombiny fragmentu ciężkiego łańcucha FVIII. Syntetyczne peptydy FVIII badano pod kątem zdolności do konkurencyjnego hamowania wiązania C5 do FVIII w systemie ELISA. Syntetyczny peptyd FVIII Thr351-Ser365 blokował wiązanie C5 z FVIII w sposób zależny od dawki w tym układzie. Dwa inne syntetyczne peptydy FVIII, Asn340-Glu354 i Glu342-Asp356, które częściowo zachodziły na Thr351-Ser365, również blokowały wiązanie C5 z FVIII. Jednak blokowanie wiązania C5 z tymi peptydami wymagało znacznie większych stężeń (ponad 100 razy silniejszych) niż te wymagane dla Thr351-Ser365. Peptyd Thr351-Ser365 również neutralizował aktywność hamującą FVIII C5 w osoczu. Ludzki inhibitor FVIII (allo-przeciwciało ciężkołańcuchowe FVIII) także został częściowo zobojętniony przez Thr351-Ser365. Thr351-Ser365 znajduje się pomiędzy miejscem cięcia trombiny (Arg372) i aktywowanym miejscem rozszczepienia białka C (Arg336) i może być w regionie lub w pobliżu regionu o znaczeniu funkcjonalnym w ekspresji aktywności prokoagulacyjnej FVIII.

Czytaj więcej artykułów medycznych...